О результатах участия референтной лаборатории по АЧС ФГБУ «ВНИИЗЖ» в международных сличительных испытаниях в 2018 г.

Ежегодно Справочная лаборатория по африканской чуме свиней (CISA-INIA, Мадрид, Испания, EURL) Европейского Союза (ЕС) организует проведение сличительных испытаний по диагностике АЧС для проверки компетенции и уровня подготовки специалистов диагностических лабораторий ЕС и других заинтересованных стран.

В 2018 году референтная лаборатория по АЧС подведомственного Россельхознадзору ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ID 45) четвертый год подряд приняла участие в данных сличительных испытаниях. Для проведения исследований ФГБУ «ВНИИЗЖ» было получено две панели шифрованных образцов проб (сыворотка (S1-S13) и суспензии органов (T1-T6)) для выявления антител и генома вируса АЧС используемыми в лаборатории методами. Следует отметить, что для проведения испытаний EURL были представлены отобранные в различные сроки после заражения пробы от животных, заражённых вирусом АЧС отличающимся по степени вирулентности, генотиповой и серотиповой принадлежности, и от животных с различными формами течения: острой и хронической.

Российские специалисты для проведения испытаний по выявлению генома вируса АЧС методом полимеразной цепной реакции использовали разработанную в референтной лаборатории ФГБУ «ВНИИЗЖ» в рамках выполнения НИР учреждения вариант Nested-PCR и тест-систему для диагностики АЧС методом ПЦР в режиме реального времени. В рамках испытаний предполагалось провести исследования 13 образцов сыворотки и 6 образцов патологического материала от инфицированных и неинфицированных свиней (рис.1а и 1 b).

Рисунок 1а.

Примечание: POS – положительный результат; NEG – отрицательный результат; WEAK – слабоположительный результат

Рисунок 1b.

Примечание: POS – положительный результат; NEG – отрицательный результат;

doubt –сомнительный результат

Результаты исследований специалистов ВНИИЗЖ показали, что в 3 пробах сыворотки крови (S3, S11, S12) и 4 пробах патологического материала (T2, T3, Т4, Т5) присутствует геном (ДНК) вируса АЧС.

При исследовании сывороток крови методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием коммерческой тест-системы для выявления антител «Ingenasa K3» (пр-ль Ingenasa, Испания) и экспериментальной тест системы на основе комплексного антигена, разработанной в референтной лаборатории по АЧС ФГБУ «ВНИИЗЖ» получены следующие результаты (рис. 2а). Подтверждение результатов проводилось рекомендованным МЭБ методом иммуноблотинга. (рис. 2b):

Рисунок 2а.

Примечание: POS – положительный результат; NEG – отрицательный результат;

В результате исследований специалисты ВНИИЗЖ определили, что в 7 образцах сывороток (S2, S4, S5, S6, S8, S9 и S10) присутствуют специфические антитела к вирусу АЧС. Результаты иммуноблотинга, как наиболее высокоспецифичного и чувствительного метода, подтвердили эти результаты (рис. 2b).

Рисунок 2b.

Примечание: + – положительный результат; Nt – отрицательный результат;

Таким образом, по результатам комплекса различных методов исследований, используемых в референтной лаборатории по АЧС ФГБУ «ВНИИЗЖ», российские специалисты успешно прошли сличительные испытания, правильно поставив диагноз для всех зашифрованных образцов (результаты подтверждены/расшифрованы EURL в Финальном отчете), тем самым подтвердив свою высокую методическую грамотность и квалификацию(рис 3).

Рисунок 3.

Примечание: POS – положительный результат; NEG – отрицательный результат; WEAK – слабоположительный результат

В своем финальном отчете специалисты EURL высоко оценили квалификацию сотрудников, диагностические наборы и тест-системы, используемые для диагностики в референтной лабораторией по АЧС ФГБУ «ВНИИЗЖ»: «Для каждого образца, включенного в XV ASFV ILCT 2018 был дан правильный диагностический результат, в соответствии с нашими ожиданиями. Исходя из полученных результатов, EU Reference Laboratory for ASF установила, что используемые вами диагностические процедуры соответствуют необходимому уровню для проведения диагностики АЧС».

Положительные результаты использования в испытаниях разработанных в ФГБУ «ВНИИЗЖ» диагностических тест-систем для диагностики африканской чумы свиней методом (ПЦР и ИФА) подтвердило перспективность их внедрения в лабораторную практику ветеринарных учреждений Российской Федерации.

Пресс-служба ФГБУ «ВНИИЗЖ»